代怀孕价格世纪_哪里找代怀女_基金项目:正交试验法优选鲜切太白黄精酒蒸炮

2023-06-05 作者:admin   |   浏览(152)

【合法代怀孕产子】

文、图/羊城晚报全媒体记者 郑达

9月18日,珠海市妇幼保健院首次成功应用第三代试管婴儿技术(胚胎种植前遗传学检测(PGT))阻断染色体倒位向子代传递,珠海市首个第三代试管宝宝顺利诞生。

钟女士夫妇结婚5年,有正常性生活,未做避孕措施却迟迟没有怀孕,加之钟女士已34岁,夫妻俩心急如焚,于是来该院生殖中心寻求帮助。

早在2015年,钟女士的造影显示双侧输卵管慢性炎症,通而不畅,功能差。B超提示子宫肌瘤。染色体核型结果显示16号染色体臂内倒位。这个结果意味着什么呢?钟女士带着困惑咨询了生殖医学中心主任许伟标。许伟标表示,倒位携带者虽然染色体位置发生了变化,但遗传物质无增减,所以临床无异常表现,但这种染色体异常如果自然受孕的话,根据遗传规律会有1/4概率生育正常染色体后代,有1/4概率生育携带倒位染色体,1/2概率生育异常染色体核型。而反复胚胎停育流产、胎儿畸形对孕妇身心来说都是极大的伤害,对一个家庭来说也是巨大的打击。

经过一系列解答,钟女士决定行胚胎种植前遗传学检测(PGT),即第三代试管婴儿,筛选染色体正常的健康胚胎移植到子宫,从而孕育健康宝宝。钟女士夫妇的治疗于2019年9月开始,包括通过促排卵、体外受精、囊胚培养、胚胎活检、胚胎种植前遗传学检测(PGT)等一系列治疗程序。最终他们送了2个优质囊胚进行PGT检测,其中有1个是未见染色体拷贝数异常的囊胚。

2019年12月成功移植该枚编号为2019_1610_01未见染色体拷贝数异常的胚胎。2020年1月31日B超确定妊娠成功。4月接受了产前羊水穿刺诊断,胎儿的染色体核型分析和染色体芯片筛查结果无异常,与PGT检测结果一致。9月18日,钟女士顺利诞下健康宝宝。

据悉,胚胎植入前遗传学检测技术(PGT)俗称“第三代试管婴儿”,是指在体外受精的胚胎移植入子宫前,通过显微操作技术获取少许细胞进行遗传学分析检测,排除携带遗传疾病的胚胎后再移植入子宫,这项技术能有效地防止遗传疾病患儿出生。

目前该中心第一代、第二代(IVF、ICSI)的成功率是60%左右,第三代试管婴儿PGT的成功率是70-80%左右。珠海市妇幼保健院生殖中心负责人蔡桂丰表示,珠海市首例三代试管婴儿的诞生,宣告了PGT技术在珠海市的成功应用,填补了珠海市的PGT技术空白,为珠海市乃至广东省地区通过PGT技术阻断染色体异常和单基因疾病,加强出生缺陷防控打下了坚实的基础。未来,该中心将继续用先进的辅助生殖技术造福更多生育问题家庭。

来源|羊城晚报·羊城派

责编|李程

审签|梁泽铭

实习生|周嘉颖

基金项目:正交试验法优选鲜切太白黄精酒蒸炮制工艺

[基金项目]

陕西省教育厅重点实验室科研计划项目(No.14JS023)

1 仪器与试药

1.1 仪器

U-3010紫外可见分光光度仪(日本日立公司);Sartorius 电子天平(1/10 万,德国);ST-803型切片机(瑞安市赛特机电有限公司);KQ-400KDE型高功率数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);DHG-9140电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司)。

1.2 试药

鸡头黄精药材采自陕西太白山,经陕西中医药大学药学院王继涛教授鉴定为百合科植物黄精Polygonatum sibiricum Red.的新鲜根茎。新鲜黄精除去须根,抢水洗,稍晾,切厚片,酒蒸。

葡萄糖对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110833-200904);黄酒(浙江绍兴县第三酒厂,批号20141202);硫酸、0.2%蒽酮-硫酸试液、乙醇等试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 黄精多糖的测定

2.1.1 对照品溶液的制备 取经105 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品33 mg,精密称定,置100 mL量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 mL中含无水葡萄糖0.33 mg)。

2.1.2 供试品溶液的制备 取60 ℃干燥至恒重的本品细粉约0.25 g,精密称定,置圆底烧瓶中,加80%乙醇150 mL,置水浴中加热回流1 h,趁热滤过。残渣用80%热乙醇洗涤3次,每次10 mL,将残渣及滤纸置烧瓶中,加水150 mL,置沸水浴中加热回流1 h,趁热滤过。残渣及烧瓶用热水洗涤4次,每次10 mL,合并滤液与洗液,放冷,转移至250 mL量瓶中,加水至刻度,摇匀。精密量取1 mL置10 mL具塞干燥试管中,照按2.1.3项下方法,自“加水至2.0 mL”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含无水葡萄糖的重量(mg),计算即得。

2.1.3 线性关系考察 精密量取对照品溶液0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL,分别置10 mL具塞刻度试管中,各加水至2.0 mL,摇匀。在冰水浴中缓缓滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度,摇匀,放冷后置水浴中保温10 min,取出,立即置冰水浴中冷却10 min,取出,以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法(通则0401),在582 nm波长处测定吸光度。以浓度(X)为横坐标,吸光度(Y)为纵坐标作图,得回归方程:Y=7.518 1X+0.163 3,r=0.999 5。线性范围为0.016 2~0.195 0 mg。

2.1.4 精密度试验 取同一供试品溶液,按2.1.3项下方法显色后测定,重复测定6次,记录吸光度。结果吸光度RSD=0.04%,表明本方法精密度良好。

2.1.5 重复性试验 取同一样品6份,每份0.25 g,精密称定,按2.1.2项下方法制成供试品溶液,每份吸取1 mL,按2.1.3项下方法显色后测定,记录吸光度。结果RSD=2.10%,表明本方法重复性良好。

2.1.6 稳定性试验 取同一供试品溶液,按2.1.3项下方法显色后,分别在0、10、20、30、40 min时测定吸光度。结果RSD=0.48%,表明供试品溶液在40 min内基本稳定。

2.1.7 加样回收率试验 取已知黄精多糖含量的样品6份,每份0.25 g,精密称定,分别加入一定量葡萄糖对照品溶液,按照2.1.2项下方法制备并测定,计算回收率为98.69%,RSD=1.03%,表明本法回收率良好。结果见表1。

表1 加样回收率试验

2.2 水溶性浸出物测定

取供试品约2 g,精密称定,置250 mL锥形瓶中,精密加水100 mL,密塞,称定重量,静置1 h后连接回流冷凝管,加热至沸腾,并保持微沸1 h。放冷后,取下锥形瓶,密塞,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,用干燥滤器滤过,精密量取滤液25 mL,置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105 ℃干燥3 h,置干燥器中冷却30 min,迅速精密称定重量。以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(%)。

2.3 醇溶性浸出物测定

取供试品约2 g,精密称定,置250 mL的锥形瓶中,精密加稀乙醇100 mL,密塞,称定重量,静置1 h后,连接回流冷凝管,加热至沸腾,并保持微沸1 h。放冷后,取下锥形瓶,密塞,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,用干燥滤器滤过。精密量取滤液25 mL,置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105 ℃干燥3 h,置干燥器中冷却30 min,迅速精密称定重量。以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量(%)。

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2.4 外观性状评分标准

参照2015版《中华人民共和国药典》一部黄精性状项下规定,确定评分。黑色,计1.0分;棕褐色,计0.8分;棕色,计0.5分。嚼之黏性足,微有酒香气,计1.0分;嚼之有黏性,酒香气若有若无,计0.8分;嚼之无黏性,无酒香气,计0.5分。味甜、无口舌麻木感,计1.0分;稍甜、稍有口舌麻木感,计0.8分;甜味淡、有口舌麻木感,计0.5分。

2.5 酒蒸太白黄精正交试验

在单因素考察和文献查阅的基础上,采用L9(34)正交试验考察蒸制时间(A)、加酒量(B)、润制时间(C)、焖制时间(D)4个因素,每个因素3个水平,以饮片外观性状、多糖、浸出物的综合评分为评价指标,优选太白黄精酒蒸工艺。因素水平见表2。

代怀公司

表2 因素水平表

综合评分标准:为客观反映酒蒸黄精工艺中各因素对黄精质量的影响,本试验将外观性状及黄精功能相关成分(黄精多糖)以及浸出物含量作为评价指标,采用综合评分法评定。因黄精多糖是黄精的主要有效成分,且为2015版《中华人民共和国药典》一部规定的黄精的指标成分,又因外观性状、浸出物含量也对黄精的质量评价具有重要意义,因而暂定综合评分=(外观性状评分/最高外观性状评分)×20+(黄精多糖含量/黄精多糖最高含量)×50+(水浸出物含量/水浸出物最高含量)×15+(醇浸出物含量/醇浸出物最高含量)×15。结果分别见表3和表4。

由极差R值分析可知,各因素作用主次顺序为ADBC,蒸制时间影响最大,焖制时间次之,其次是加酒量,最后是润制时间。最佳工艺为A2B3C1D2。方差分析结果显示,P值均小于0.01,4个因素均为主要影响因素。因而初步认为最佳炮制工艺:取黄精,加30%黄酒润6 h,蒸10 h,焖6 h,取出,切4 mm厚片,干燥。

表3 正交试验设计表及结果(n=2)

表4 方差分析表

注:F 0.01(2,9)=8.02。

2.6 验证试验

按照上述最佳的炮制工艺,取黄精10 kg,平行制备3份黄精样品。取样测定蒸制品中黄精多糖的含量、浸出物含量,并对外观性状进行评分。见表5。

表5 酒黄精最佳炮制工艺验证试验

结果表明,确定的工艺操作简便,合理可控。

3 讨论

黄精由于含有大量的粘液质和糖分,在炮制过程中,除了一般的洁净处理外,要防止用水浸泡,以防有效成分流失。因此,药材的软化以焖润为宜。不管采用何种辅料炮制,都必须使辅料全部被吸尽,内无干心,以便最大限度地发挥药物的治疗作用[吉山花瑶]。

外观质量评价是传统意义上的中药饮片质量标准,同时是目前单一化学成分和化学部位不能替代的评价标准[3],因此将其作为正交试验的指标之一。黄精多糖是黄精的主要药效成分,具有延缓衰老、降血糖、降血脂、调节免疫、防止动脉粥样硬化、抗肿瘤等药理作用[4-8],故将其作为评价指标之一。

本试验仅从外观性状、化学成分和浸出物的角度优选太白黄精酒蒸炮制工艺,在以后的研究中,还应该采用联合化学成分、指纹图谱、药效等多指标来综合评价炮制工艺,以便更好地适用于临床。

总结:

鲜切太白黄精最佳酒蒸工艺为取黄精,加30%黄酒,润制6 h,蒸制14 h,焖制6 h,取出,切4 mm厚片,干燥。结论:优选得到的鲜切太白黄精酒蒸炮制工艺稳定,可为其产地加工炮制一体化技术提供试验依据。

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参考资料

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